Ako znížiť nešpecifickej väzbe na kontajnery

V Immunoassay väzbové kapacita v nádobe alebo v jamiek mikrotitračnej doštičky , je vyššia , než je množstvo proteínu , ktoré je na zásobníku alebo studne . Pre zníženie alebo prevenciu protilátky alebo iné typy proteínov a molekúl absorbovať do kontajnera alebo jamiek , musí byť test sa premyje s vhodným pufrom a špecifický blokujúci činidlá musia byť pridané . Typ pamäte a blokovanie činidlo zvolený, závisí od typu experimentálnych assay.Things budete potrebovať
platne
Pufer
Blokovanie činidlo
pipetou
Antigén
protilátok

Ukázať MoreInstructions fna predaj 1

Coat sa platne s antigénom . Použite riedenie antigénu . Čisté riešenie antigénu , pretože len asi 3 percentá proteínu vo vzorke , je cieľový proteín nie je potrebný . Pri riedení , zabezpečiť , že vzorky obsahujú antigén v koncentrácii , ktorá je v rámci rozsahu detekcie protilátky . Odpipetovat riediaceho antigén riešenie dole na platne . Niektoré dosky môžu byť potiahnuté antigénom . Prečítajte si pokyny dodané s doskou studne .
2

Krycie dosky s lepiacou plastu a inkubovať cez noc . Platničky premyte s roztokmi pufra , ako je Tris - pufrovanom fyziologickom roztoku alebo fyziologickom roztoku pufrovanom fosfátom . Umyť , opláchnuť dosky pomocou plastovej fľaše naplnené tlmivým roztokom cez výlevky . Pat dosky s papierovým uterákom na odstránenie zostávajúce kvapky roztoku pufra .
Sims 3

Znížiť nešpecifické väzby proteínov a molekúl pomocou blokovacieho pufra alebo činidlá , ako je napríklad čistiacim prostriedkom blokátor , sušené mlieko alebo hovädzie sérum . Typ blokovanie činidlá bude závisieť na teste . Pridajte blokovacieho činidla do jamiek pomocou pipety . Znovu zakryte dosku pomocou lepiacej plastu a inkubovať cez noc .
4

znovu umyť tanier jamky znovu s použitím roztoku pufra . Tieto kroky sa zníži množstvo nešpecifickej väzby , ktoré môžu nastať na dosku jamiek pred pridaním roztoku protilátky nevyhnutné pre riadenie . Okrem toho môžu blokujúce činidlá pomáhajú znižovať farbu pozadia vo výsledkoch testov .