Aký je vzťah medzi Opravil optickej hustoty a počtu buniek ?

Optická hustota - miera , do akej miery je látka prepúšťa svetlo - je často používaný na meranie koncentrácie buniek alebo častíc , ktoré sú rozptýlené , ale ešte nezanikli , v tekutiny . Korigovaná Optická hustota tohto typu zmesi , známe ako suspenzia , je priamo úmerná koncentrácii , hustotu alebo počet buniek rozptýlených v ňom . Beer - Lambert právo

zákon Beer - Lambert , ktorý uvádza , že absorbancia je priamo úmerná alebo má lineárny vzťah , koncentráciu absorbujúce druhov , je pravda len pre optické hustoty pod 0,4 . Avšak , vzorky s optickej hustoty vyššou ako 0,4 možno riediť definovaným faktorom riedenia a ich optickej hustoty meranej . Sú namerané hodnoty vydelí činiteľom zriedenia , za vzniku opravený optickú hustotu , táto nová hodnota je priamo úmerná počtu buniek vo vzorke .
Spektrofotometer

Optická hustota sa meria na zariadenia, známeho ako spektrofotometra , ktorý porovnáva jas svetla vyžarovaného z dvoch zdrojov , z ktorých jeden má niektoré štandardné vlastnosti . Ako svetlo prechádza bunkovej suspenzie , svetlo rozptýlené bunkami tak , že menšie z nich dosiahne fotoelektrický článok - elektronické zariadenie, ktorého výstupný elektrický sa líši v závislosti na sile svetla dopadajúceho na ňu - v spektrofotometra . To znamená , že čím vyšší je počet buniek v suspenzii slabší elektrický výstup fotoelektrického článku a vice versa .
Optická hustota Korekcia

na optický hustoty nad 0,4 , tituly , na ktoré bunky môžu byť zatienené inými bunkami alebo odrážať svetlo mnohokrát nie je zanedbateľná . Pri vyšších optickej hustoty , nekorigovaná optická hustota bunkovej suspenzie už nie je priamo úmerná počtu buniek . Avšak , nekorigované optická hustota zriedených suspenzií buniek je takmer úmerná ich presne známe, relatívnej hustoty - pomer ich hustôt k tomu referenčnej látky , ako je voda - tak to je rozumné pracovný predpoklad , že bez korekcie optická hustota suspenzia vysoko zriedenej buniek je , v skutočnosti , je to pravda optická hustota .
Relatívna optická hustota

Vynásobením relatívnu hodnotu hustoty každej bunkovej suspenzie o základné optická hustota hodnoty získané z vysoko zriedenej suspenzie buniek , je možné získať opravený optickú hustotu . Avšak , aby meranie čo najpresnejšie , základná hodnota optickej hustoty by mali byť získané z niekoľkých spektrofotometrických čítania .